溝口勝政の子。幼名は竹丸。通称は金右衛門。初名は定勝。伯耆守・従五位下。越後国新発田藩の初代藩主。
はじめ丹羽長秀に仕えていたが、戦功を認められて天正９年（１５８１）４月より織田信長の直臣となり、若狭国高浜城主として５千石を領有するに至った。
天正１１年（１５８３）の賤ヶ岳の合戦では羽柴秀吉方に属し、戦後に加賀国江沼郡に４万６千石を与えられ、大聖寺城主となる。
天正１３年（１５８５）に長秀が没したのちは秀吉の直臣となり、堀秀政の与力を命じられた。
天正１４年（１５８６）１１月、従五位下・伯耆守に叙位・任官。このとき名を秀勝に改めた。
天正１５年（１５８７）の九州征伐、天正１８年（１５９０）の小田原征伐にも従軍。
天正２０年（＝文禄元年：１５９２）の文禄の役に際しては肥前国名護屋に駐留、同城の普請と警護にあたった。
慶長３年（１５９８）堀氏の越後国移封に伴って秀勝も加増転封の沙汰を受け、越後国新発田城主として６万石を領有し、新発田城の普請・城下町の建設、検地、治水などに意を注ぎ、後世の幕藩体制における新発田藩の基礎を作った。
慶長５年（１６００）の関ヶ原の役では東軍に属し、堀氏に従って上杉景勝に加担して蜂起した一揆を鎮圧する功績を挙げ、戦後に所領を安堵された。
天正１５年（１６１０）９月２８日、新発田で没した。６３歳。法名は宝光院殿前伯州太守性翁浄見大居士。