斎藤義龍の庶子。通称は喜太郎。右衛門大夫。美濃国稲葉山城主。
永禄４年（１５６１）に父・義龍の死によって家督を相続する。
永禄７年（１５６４）２月６日、家臣の竹中重治（半兵衛）によって突如、居城の稲葉山城を乗っ取られる。稲葉山城は同年８月に返却されるが、この一件により斎藤家臣団の結束の弱体が暴露され、そこを隣国・尾張の織田信長につけこまれることとなった。
永禄１０年（１５６７）、稲葉一鉄・氏家卜全・安藤守就ら美濃三人衆をはじめとする家臣の相次ぐ離反によって戦力を失い、三人衆を内応させた信長によって稲葉山城を逐われた（稲葉山城の戦い：その２）。これにより美濃国の戦国大名・斎藤氏は滅亡した。
以後は伊勢国長島、畿内へと移り、一向一揆や三好三人衆と結んで信長に対抗した。さらには近江国の浅井長政を経て越前国の朝倉義景を頼って執拗に信長に対抗したが、朝倉氏滅亡に先立つ天正元年（１５７３）１０月４日、越前国刀禰坂の合戦で敗死した。２６歳。法号瑞雲院龍貞居士。