享徳の乱を山内上杉氏とともに戦い抜き、長尾景春の乱を鎮圧する過程において大きく威勢を伸ばした扇谷上杉氏であったが、扇谷上杉氏の家宰であり、長尾景春の乱鎮圧に大きく寄与した太田道灌が文明１８年（１４８６）７月２６日、主君である扇谷上杉定正によって謀殺された。定正が道灌を誅殺するに至った経緯には、定正が急速に成長した道灌を警戒したとするものや、扇谷上杉氏の伸張に危機感を持った関東管領・山内上杉顕定による謀計、また扇谷上杉氏内部での家宰職をめぐる曾我氏との権力闘争によるもの、など諸説ある。
いずれにしても道灌の死後はその嫡子・太田資康が上杉顕定の下へと逐電しただけでなく、それに続いて扇谷上杉氏に従っていた国人領主らの多くが山内上杉氏に属すようになったため、両上杉氏の力の差は再び開くこととなったのである。
これを顕定の謀計と見た定正は、顕定に対する戦略として古河公方・足利政氏や長尾景春と結んだ。
一方、この情勢を見た顕定も、実兄の上杉定昌や実父で越後守護である上杉房定に支援を要請。これを契機として山内・扇谷の両上杉氏の確執が深まっていったのである。
そして長享元年（１４８７）１１月、扇谷上杉方であった下野国勧農城を上杉定昌が攻めたことを発端として、両上杉氏の分裂抗争が起こったのである。この後、越後守護・上杉房定が山内上杉氏を支援するために越後国から軍勢を派遣し、この抗争は関東地方のみならず、越後国をも巻き込んで拡大していくこととなる。
この両陣営はその後も長享２年（１４８８）２月に実蒔原、６月に須賀谷原、１１月には高見原で武力衝突に及んだ。これらの合戦はいずれも扇谷上杉方が勝利したが、決定的な打撃を与えるには至らなかったために武蔵国を主戦場として対峙する状態が続いており、延徳２年（１４９０）１２月になってようやく一応の和議が調った。
こうして情勢は沈静化したかに見えたが、関東を揺るがす事件が起こる。明応２年（１４９３）１０月、堀越公方の内乱に乗じて駿河国興国寺城主・北条早雲が伊豆国に侵攻して足利茶々丸を逐い、堀越公方を滅亡させたのである（伊豆の乱）。
伊豆国は実質的には堀越公方が支配していたが、山内上杉氏の守護領国である。早雲はこの伊豆国への侵攻に際し、顕定と対立していた定正と結ぶことによって侵攻の容易化を図ったと見られており、ここに山内上杉氏と扇谷上杉氏の対立が再燃することになった。
この両陣営の衝突は明応３年（１４９４）夏に再開され、８月には武蔵国関戸要害、９月には相模国玉縄要害をめぐる攻防戦が展開された。この後、定正は顕定が本拠としていた鉢形城を衝くべく侵攻を開始し、早雲も扇谷上杉勢に応じて武蔵国に軍勢を進めている。
また、９月２３日には三浦義同（道寸）が養父で相模国三浦郡新井城（別称：三崎城）主の三浦時高を討っている。この義同は定正の兄・高救の子であることから定正の甥にあたるが、娘婿が山内上杉氏に逐電した太田資康であるという経緯から両陣営にも縁故があり、どちらの陣営に属したかは不詳である。
これらの情勢を受けて山内上杉勢は戦線を後退させることとなり、両陣営は荒川（現在の元荒川）畔の高見原で対峙した。
しかし１０月５日に荒川を渡ろうとした定正が頓死したため、扇谷上杉・北条勢ともに退却した（高見原の合戦：その２）。
なお、扇谷上杉氏の家督は定正の甥で養子となっていた上杉朝良が継承した。
この定正の死後、政情に変化が現れる。それまで扇谷上杉方に与していた足利政氏が山内上杉陣営に鞍替えし、同年１１月に両上杉陣営が交戦した際には山内上杉方として出陣している。
明応５年（１４９６）７月、山内上杉勢は相模国西部に侵攻。これを長尾景春らが迎撃して大激戦となった。この合戦は山内上杉勢の勝利となり、続いて東部の実田（真田）要害を包囲。これに対して上杉朝良は後詰のために援兵を率いて江戸城から出陣し、さらには長尾景春が武蔵国へ出陣するとの報を得た山内上杉勢は軍勢を転じ、武蔵国上戸に陣を築いて河越城を圧迫するなど、一進一退の攻防が続けられた。
永正元年（１５０４）８月２１日、山内上杉勢は河越城を攻めたが落とすことができず、今度は江戸城を攻めるために陣を白子に移した。これに対して朝良は駿河守護・今川氏親と北条早雲に援軍を求めた。この今川・北条の援軍は９月２０日には武蔵国登戸の枡形山に着陣しており、これに対抗すべく山内上杉勢も足利政氏を奉じて立川の普済寺に陣を張った。この両陣営が激突したのが２７日の立河原の合戦である。この合戦は扇谷上杉勢が勝利し、顕定は鉢形城への撤退を余儀なくされた。
しかし顕定は実弟で越後守護の上杉房能に援軍を要請し、１２月には武蔵国椚田要害と相模国の実田（真田）要害を攻略した（椚田・実田の戦い）。
勢いに乗る山内上杉勢は永正２年（１５０５）２月に再び河越城を包囲。３月７日には多くの死傷者を出す戦闘があり、ついに河越城を支えきれなくなった上杉朝良が降伏を申し入れたのである。
この朝良の降伏によって、２０年間に亘って続けられた両上杉氏の抗争は終結したのであった。
この降伏交渉の条件は朝良の隠退と、その名代（後継者）の古河公方への帰順であった。朝良は出家して建芳と号し、朝良の名代としては朝良の甥・上杉朝興が擁立された。